Glavni / Simptomi

Brojanje bijelih krvnih stanica

Simptomi

Princip. Brojanje leukocita tijekom mikroskopije na određenom broju kvadrata komore za brojanje i izračun njihovog broja u 1 litri krvi, uzimajući u obzir razrjeđivanje krvi i volumen komore za brojanje.

Reagens: 3-5% otopina octene kiseline, obojena za bojenje jezgre leukocita s nekoliko kapi otopine metilen plavog. Otopina ima plavu boju, može se pohraniti dugo vremena.

Tijek određivanja. U suhu epruvetu uliti 0,4 ml otopine octene kiseline. Iz prstiju se izvlači 0,02 ml krvi (moguće je koristiti vensku krv stabiliziranu antikoagulantom). Obrišite vrh pipete, zatim ispuhajte krv iz nje na dno epruvete, promiješajte, ponovno birajte i otpuhajte mješavinu krvi i reagensa (pipetiranje). Označite epruvetu i ostavite je do prebrojavanja. Store mješavinu krvi s otopinom octene kiseline se preporučuje ne više od 2-4 sata.

Razrijeđena krv u epruveti s octenom kiselinom se temeljito promiješa i napuni komorom za brojanje. Punjena komora ostavljena je u horizontalnom položaju 1 min za taloženje leukocita. Bez mijenjanja vodoravnog položaja fotoaparata, stavljaju ga na stol mikroskopa i pri malom povećanju (okular 10 ×, objektiv 8 ×) broje leukocite u 100 velikih kvadrata, što odgovara 1600 malih.

Za veću točnost, leukociti se broje preko cijele rešetke na velikim kvadratima, ne dijele se na male kvadrate i pruge, počevši od gornjeg lijevog kuta rešetke. Za bolji kontrast zamračite vidno polje, spustite kondenzator i zatvorite otvor. Stanice koje se nalaze unutar kvadrata i leže na bilo koje dvije linije broje se kako ne bi dvaput brojale istu ćeliju.

Izračun broja leukocita provodi se prema formuli:

gdje je X broj leukocita u 1 μl krvi; i - broj leukocita u 100 velikih kvadrata; 20 - razrjeđenje krvi; 100 je broj velikih kvadrata; 250 je faktor konverzije za 1 μl, budući da je volumen jednog velikog kvadrata 1/250 μl (strana kvadrata je 1/5 mm, visina 1/10 mm).

U praksi, da bi se izračunao broj leukocita u 1 μl krvi, njihov broj u 100 velikih kvadrata pomnoži se s 50, au 1 litru - dobivena vrijednost množi se s 106.

Napomena. Kod brojanja leukocita, pogreška je neizbježna u 6-8% slučajeva.

  1. Kod velikog broja normocita u perifernoj krvi, oni se broje u broju leukocita (i leukociti i normociti su stanice jezgre). Da bi se ispravno utvrdio broj leukocita, broj normocita treba oduzeti od ukupnog broja nukleiranih krvnih stanica.
  2. Preostale pogreške su slične onima koje se pojavljuju pri izračunavanju broja crvenih krvnih zrnaca u komori za brojanje.

Brojanje bijelih krvnih stanica

Brojanje broja leukocita i trombocita

Čimbenici koji utječu na ispravnost istraživanja bijelih krvnih stanica

- dugo čuvanje krvi na sobnoj temperaturi

Broj leukocita u krvi

Dob Broj leukocita

- 1 dan 11,6 - 22,0

- 1 tjedan 8.1.- 14.3

- 1 mjesec 7,6 - 12,4

- Odrasli 4.0 - 9.0

Metode za određivanje broja leukocita u krvi.

- Brojanje broja leukocita u komori za brojanje

- Broj leukocita u hematološkim analizatorima

Određivanje broja leukocita u komori za brojanje.

- Brojanje leukocita pod mikroskopom provodi se nakon liziranja crvenih krvnih zrnaca u 100 velikih kvadrata računske mreže i ponovno izračunava za 1 litru krvi, na temelju volumena kvadrata i razrjeđenja krvi. Brojanje leukocita treba provesti u roku od 2-4 sata nakon uzimanja krvi.

- U prisutnosti crvenih krvnih stanica u perifernoj krvi, one se ne liziraju i broje zajedno s leukocitima. U ovom slučaju, za određivanje pravog broja leukocita, broj stanica u crvenom redu se oduzima od ukupnog broja prebrojenih stanica.

- Na primjer: Ukupan broj leukocita u izračunu u komori (ili na analizatoru) -45x109 / l. Kada se izračunava formula leukocita, nađeno je da je prisutno 50 eritroblasta (normoblasta) na 100 leukocita.

Izračunavamo pravi broj leukocita u krvi:

150 stanica - 45 x 109 / l

100 stanica (leukociti) - X

X = 100x45x10 / l / 150 = 30x10 / l

Dakle, pravi broj leukocita u krvi je 30 x 109 / l.

Glavni izvori pogrešaka u izračunu leukocita u komori:

- Neispravan omjer volumena krvi i octene kiseline u epruveti.

- Neispravno pripremljena otopina octene kiseline (u koncentraciji većoj od 5%, mogu se lizirati neki leukociti, što će dovesti do podcjenjivanja rezultata).

- Produženo izlaganje uzorka na temperaturi iznad 28 ° C, što može ubrzati lizu leukocita u uzorku i dovesti do podcjenjivanja rezultata.

- Nepravilno punjenje komore Goryaev. Kao i kod brojanja crvenih krvnih zrnaca, fotoaparat mora biti ostavljen 1 minutu da se stanice slegnu.

- Kamera Goryaev nije bila dobro oprana nakon prethodne definicije. Leukociti koji ostaju u komori mogu precijeniti rezultate analize.

Metode brojanja trombocita

- u komori za brojanje

Svaka skupina metoda ima prednosti i nedostatke.

- Brojanje trombocita u komori je dovoljno precizno, ne zahtijeva izračunavanje broja crvenih krvnih stanica. S druge strane, ova metoda je zahtjevnija, jer su trombociti u izvornom obliku predstavljeni malim i slabo kontrastnim elementima. Nedostatak metode je brojanje trombocita u narednim satima nakon uzimanja krvi.

- Određivanje broja trombocita u razmazu krvi značajno je inferiorno po svojoj točnosti prema komornoj metodi ili automatskim brojačima. Pogreške u brojanju krvnih razmaza mogu biti uzrokovane lošom kvalitetom razmaza i pripadajućom neravnomjernom raspodjelom trombocita, netočnim određivanjem broja crvenih krvnih stanica. Značajan nedostatak metode je potreba za istovremenim brojanjem trombocita i crvenih krvnih stanica u krvi. Prednost je u mogućnosti proučavanja trombocita u bilo koje vrijeme, bez obzira na vrijeme prikupljanja krvi.

- Metoda određivanja trombocita pomoću hematološkog analizatora omogućuje točno određivanje broja trombocita, njihovog prosječnog volumena i raspodjele po volumenu.

Brojanje leukocita u komori za brojanje

Princip. Brojanje leukocita tijekom mikroskopije na određenom broju kvadrata komore za brojanje i izračun njihovog broja u 1 litri krvi, uzimajući u obzir razrjeđivanje krvi i volumen komore za brojanje.

Reagens: 3-5% otopina octene kiseline, obojena za bojenje jezgre leukocita s nekoliko kapi otopine metilen plavog. Otopina ima plavu boju, može se pohraniti dugo vremena.

Tijek određivanja. U suhu epruvetu uliti 0,4 ml otopine octene kiseline. Iz prstiju se izvlači 0,02 ml krvi (moguće je koristiti vensku krv stabiliziranu antikoagulantom). Obrišite vrh pipete, zatim ispuhajte krv iz nje na dno epruvete, promiješajte, ponovno birajte i otpuhajte mješavinu krvi i reagensa (pipetiranje). Označite epruvetu i ostavite je do prebrojavanja. Store mješavinu krvi s otopinom octene kiseline se preporučuje ne više od 2-4 sata.

Razrijeđena krv u epruveti s octenom kiselinom se temeljito promiješa i napuni komorom za brojanje. Punjena komora ostavljena je u horizontalnom položaju 1 min za taloženje leukocita. Bez mijenjanja vodoravnog položaja fotoaparata, stavljaju ga na stol mikroskopa i pri malom povećanju (okular 10 ×, objektiv 8 ×) broje leukocite u 100 velikih kvadrata, što odgovara 1600 malih.

Za veću točnost, leukociti se broje preko cijele rešetke na velikim kvadratima, ne dijele se na male kvadrate i pruge, počevši od gornjeg lijevog kuta rešetke. Za bolji kontrast zamračite vidno polje, spustite kondenzator i zatvorite otvor. Stanice koje se nalaze unutar kvadrata i leže na bilo koje dvije linije broje se kako ne bi dvaput brojale istu ćeliju.

Izračun broja leukocita provodi se prema formuli:

gdje je X broj leukocita u 1 μl krvi; i - broj leukocita u 100 velikih kvadrata; 20 - razrjeđenje krvi; 100 je broj velikih kvadrata; 250 je faktor konverzije za 1 μl, budući da je volumen jednog velikog kvadrata 1/250 μl (strana kvadrata je 1/5 mm, visina 1/10 mm).

U praksi, da bi se izračunao broj leukocita u 1 μl krvi, njihov broj u 100 velikih kvadrata pomnoži se s 50, au 1 litru - dobivena vrijednost množi se s 106.

Napomena. Kod brojanja leukocita, pogreška je neizbježna u 6-8% slučajeva.

  1. Kod velikog broja normocita u perifernoj krvi, oni se broje u broju leukocita (i leukociti i normociti su stanice jezgre). Da bi se ispravno utvrdio broj leukocita, broj normocita treba oduzeti od ukupnog broja nukleiranih krvnih stanica.
  2. Preostale pogreške su slične onima koje se pojavljuju pri izračunavanju broja crvenih krvnih zrnaca u komori za brojanje.
  • Brojanje bijelih krvnih stanica u hematološkom analizatoru (automatski brojač)

Broj leukocita

Naslovnica / Priručnik kliničke laboratorijske dijagnostike / Krvni test / Leukociti / Određivanje broja leukocita

Metoda brojanja fotoaparata

Snimanje i razrjeđivanje krvi dobiveno analizom epruvete. 0,4 ml tekućine za razrjeđivanje i 0,02 ml kapilarne krvi unose se u epruvetu (po mogućnosti Vidalevskaya). Dobiveno razrjeđenje praktički se smatra 1:20, a kao razrjeđivač se obično koristi 3-5% -tna otopina octene kiseline obojana metilenskim plavim (lizes octene kiseline, eritrociti, metilensko plavo, jezgre leukocita). Prije punjenja komore Goryaeva cijev s razrijeđenom krvi temeljito se protrese. Komora je napunjena na isti način kao i za brojanje crvenih krvnih stanica.

Leukociti su mnogo manji od eritrocita (1-2 na veliki kvadrat), stoga se za točnost broje u 100 velikih kvadrata (negradirani).

Izračun: 100 velikih kvadrata (1600 malih) računalo je leukocite. Podsjetivši da je volumen malog kvadrata 1/4000 mm3, a krv razrijeđena 20 puta, broj leukocita u 1 μl krvi izračunat je: 4000 * 20 i podijeljen sa 1600 = a * 1/2. Praktično, za dobivanje stvarnog sadržaja leukocita u 1 μl krvi, dovoljno je podijeliti na pola broj dobiven u izračunu i dodati 2 nule. Prosječna pogreška metode je ± 7%.

Točnije (pogreška od 2-3%) i savršena je broj bijelih krvnih stanica pomoću elektroničkih uređaja. Brojanje leukocita u brojačima čestica provodi se prema istom principu kao i crvene krvne stanice. Pretkrvina se razrijedi i pomiješa s bilo kojim reagensom koji lizira crvene krvne stanice. U analizatoru "Technicon" kao takvom koristite otopinu octene kiseline, u aparatima "Culter" i "Celloskop" - saponin ili sapoglobin, koji se dodaju razrijeđeni (1: 500, 1: 700) u izotoničnoj otopini natrijevog klorida (6 kapi po 20 ml). razrjeđenje).

Broj leukocita i broj leukocita.

Za brojanje leukocita, krv se razrjeđuje u mješalicama ili u epruvetama. U tu svrhu upotrijebite 3-5% -tnu otopinu octene kiseline (za uništenje crvenih krvnih zrnaca), obojenu bilo kojom anilinskom bojom (za bojenje jezgre leukocita). Mreža za brojanje je ispunjena na isti način kao i za brojanje crvenih krvnih stanica. Leukociti se broje u 100 velikih kvadrata. U Goryaevovoj mreži prikladno je brojati ih u neprekinutim kvadratićima (na njima ih ima 100). S obzirom na razrjeđenje krvi i volumen tekućine iznad kvadrata, izračunajte konstantni množitelj. Kada se uzgaja 20 puta to je 50.

Prilikom rada s epruvetama u njih se prethodno ulije 0,38 ml tekućine i u nju se ispusti 0,02 ml krvi. Da bi se izračunalo automatsko brojanje u epruvetama, crvene krvne stanice su hemolizirane saponinom. Normalni sadržaj leukocita je 4.3 • 109-11.3 • 109 / l, ili 4300-11 300 u 1 μl krvi.

Brojanje leukocita broji se u obojenim razmazima.

Dobar razmaz ispunjava sljedeće zahtjeve: tanak je, a oblikovani elementi leže u njemu u jednom sloju; u ovom slučaju razmaz je žut i proziran. Dobar razmaz je jednolik, a stanice se ne oštećuju razmazivanjem. Da bi se krv ravnomjerno položila na staklo, odmašćuje se spaljivanjem preko plamena plinskog plamenika ili čuva u smjesi alkohola i etera. S krajem čaše dodiruju svježe ispuštenu kapljicu krvi i bez odlaganja ga šire na staklu. Prije bojenja, razmaz se fiksira uranjanjem u metanol tijekom 3 minute, u etanolu ili njegovoj smjesi s eterom tijekom 30 minuta. Postoje i brojni drugi popravljači. Bris, osušen nakon fiksacije, ispunjen je bojom.

Za razlikovanje krvnih stanica (definicije formule leukocita) pribjegavajte diferencijalnom bojanju. Najčešće korištena bojanja Romanovskog-Giemsa. Ova boja je mješavina slabo kiselih (eozina) i slabo alkalnih (azurno-plavih) boja. Stanice i njihovi dijelovi, ovisno o reakciji medija, u njima uočavaju jednu ili drugu komponentu boje: kisele (bazofilne) tvari su obojene azurno plavom, alkalnom (oksifilnom) obojenom eozinom crvenom; Neutralno percipiraju obje boje i postaju ljubičaste.

Leukocitna formula odnosi se na postotak pojedinačnih oblika leukocita u krvi.

NAPOMENA: Za razumno precizan izračun potrebno je pregledati najmanje 200 bijelih krvnih stanica.

Brojanje se vrši pomoću imerzijskog sustava. S obzirom na to da su stanice nejednako smještene u razmaku (veće one idu na rubove), važno je pridržavati se redoslijeda kretanja na razmazu u kojem su jednako vidljivi njegovi rubovi i srednji dio. Koristi se jedan od dva načina kretanja: jedan od njih pomiče potez od gornjeg ruba do dna, pomiče 2 do 3 vidna polja duž ruba, zatim se kreće u suprotnom smjeru od gornjeg ruba, itd. U drugoj metodi, oni se kreću od ruba za 5. - 6 polja do sredine udarca, zatim onoliko bočno, a zatim natrag do ruba, pomaknite se u stranu nekoliko strana i ponovite pokret opet dok se ne izbroje 50 stanica. Pogledajte 4 od tih mjesta na 4 ugla razmaza. Brojeći 200 stanica, broj se dijeli na pola i određuje se broj svake vrste leukocita.

Leukociti su elementi krvi, koji brzo reagiraju na različite vanjske utjecaje i promjene unutar tijela. Određivanje ukupnog broja leukocita može biti od velike dijagnostičke vrijednosti, jer otkriva stanje krvotvornih organa ili njihov odgovor na štetne učinke. Povećanje broja leukocita - leukocitoza - rezultat je aktivacije leukopoeze, smanjenje njihovog broja - leukopenija - može ovisiti o inhibiciji krvotvornih organa, njihovom smanjenju i povećanom razgradnji leukocita pod djelovanjem anti-leukocitnih antitijela 1. Neutrofili. Najviše varijabilna skupina leukocita su neutrofili, čiji se broj povećava s mnogim infekcijama, intoksikacijama i razgradnjom tkiva.

Karakteristika aktivnog neutrocesa nije samo povećanje ukupnog broja neutrofila u krvi, već i pojava nezrelih oblika u njemu: povećava se broj ubodnih stanica, pojavljuju se mladi neutrofili, ponekad čak i mielociti. Takvo "pomlađivanje" sastava neutrofila naziva se pomicanje leukocita u lijevo. Zaštitnu ulogu neutrofila određuje njihova fagocitna funkcija, baktericidno djelovanje i oslobađanje proteolitičkih enzima koji potiču resorpciju nekrotičnog tkiva i zacjeljivanje rana.

Najčešće dolazi do regenerativnog pomaka u prisutnosti bilo kojeg upalnog procesa ili žarišta nekroze. Vrlo oštar lijevi pomak prema promijelocitima pa čak i mieloblastima sa značajnom leukocitozom naziva se leukemoidna reakcija. Smanjenje broja neutrofila - apsolutne neutropenije - događa se kada koštana srž inhibira izlaganje toksinima nekih mikroorganizama (uzročnika tifusne groznice, bruceloze itd.) I virusa, ionizirajućeg zračenja, brojnih lijekova.

2. Limfociti. Limfocitoza se opaža u razdoblju oporavka od akutnih zaraznih bolesti, s infektivnom mononukleozom, infektivnom limfocitozom, limfocitnom leukemijom, rubeolom, brucelozom, tirotoksikozom.

Apsolutna limfopenija javlja se kod bolesti zračenja, sistemskih lezija limfnog sustava: limfoma, limfosarkoma.

3. Eozinofili. Nalaze se u krvi u relativno malim količinama (uglavnom u tkivima), no njihov se broj ponekad značajno povećava kod alergijskih procesa (serumska bolest, bronhijalna astma), helmintske invazije i pruritične dermatoze.

Smanjenje broja eozinofila - eozinopenije - do njihovog potpunog nestanka zabilježeno je kod sepse, teških oblika tuberkuloze, tifusa i teške intoksikacije.

4. Bazofili. Oni su nositelji važnih posrednika u metabolizmu tkiva ("ekvivalenti" stanica stanica masnog tkiva). Kada je organizam senzibiliziran, njihov se broj povećava, a kada se alergen ponovno uvede, naglo se smanjuje kao posljedica njihovog sloma.

5. Monociti. Povećanje broja monocita - monocitoza - pokazatelj je razvoja imunoloških procesa. Monociti se prepoznaju kao analozi tkivnih makrofaga. Monocit se nalazi u brojnim kroničnim bolestima (kroniosepsija, tuberkuloza, sifilis). Monocitopenija se ponekad primjećuje kod teških septičkih, hipertoksičnih oblika tifusa.

Agranulocytes. Karakteristična značajka agranulocita su nerazlučena jezgra i bazofilna (plava) citoplazma.

Limfociti su najmanja veličina leukocita. Jezgra je okrugla, ovalna ili u obliku graha; zauzima najveći dio stanice, intenzivno obojen. Citoplazma većine limfocita s uskim rubom okružuje jezgru, obojena je svijetlo plavom bojom i pročišćena je do jezgre.

Monocit je najveći od krvnih stanica. Velika jezgra nepravilnog oblika i relativno svijetle boje. Citoplazma je sivkasto-plava, zadimljena boja, nije razjašnjena do jezgre

Osim ovih stanica, rijetko je u normalnoj krvi, a plazma stanice se često mogu pojaviti kod bolesti. Odlikuju se ekscentrično smještenom gustom jezgrom, često strukturom nalik kotaču. Broj tih stanica se povećava s određenim zaraznim bolestima, sepsom rane i mijelomom.

Prilikom izračunavanja formule leukocita, pozornost se posvećuje ne samo kvantitativnim pomacima u njoj, već i kvalitativnim promjenama u elementima forme. Prethodno su zabilježene degenerativne promjene u leukocitima. Uz ozbiljnu intoksikaciju, granulacija neutrofila postaje obilna, velika, intenzivno obojena i naziva se toksična (ili toksogena). Ponekad se u razmazu krvi pronađu nejasna mjesta, obojena poput nuklearne tvari leukocita. To su tzv. Botkin - Humprecht sjene - ostaci nuklearnog kromatina, što ukazuje na povećanu krhkost leukocita koja dovodi do njihove razgradnje - leukocitoliza

99. Metode određivanja krvne grupe, pojam Rh faktora.

1. Određivanje krvne grupe standardnim serumima:

Potrebna je sljedeća oprema:

dva seta standardnih seruma hemaglutinirajućih I (0), II (A), III (B) skupina od dvije različite serije i jedna bočica seruma IV (AB)

• bočicu s izotoničnom otopinom natrijevog klorida s pipetom

o čistu suhu ploču očistiti

o staklena stakalca

o sterilne igle za koplje za probijanje pulpe prsta

o sterilne loptice od gaze,

Standardni serumi za određivanje krvne grupe prema ABO sustavu proizvedeni su s određenom bojom: I (0) je bezbojan, II (A) plavi, III (B) crveni, IV (AB) žuti. Serum pohranjen na 4-10 ° C. Serum treba biti lagan i proziran. Prisutnost pahuljica, sedimenta, zamućenosti znakovi su nepodobnosti seruma. Prvi znakovi aglutinacije trebali bi se pojaviti najkasnije 30 sekundi.

Ploča je podijeljena u 4 kvadrata obojenom olovkom, au smjeru kazaljke na satu označeni su kvadratići I (0), II (A), III (B). Veliku kapljicu seruma dvije skupine I (0), II (A), III (B) skupina stavlja se u odgovarajući kvadrat ploče s pipetom. Pločica za prst je tretirana alkoholom, a igla je probušena. Prva kap krvi se ukloni lopticom od gaze, a kapljice u različitim dijelovima klizača nanose se sukcesivno na kapljice seruma i temeljito miješaju. Kap krvi trebala bi biti 5-10 puta manja od kapi seruma. Zatim tresući ploču temeljito pomiješati krv sa serumom. Preliminarni rezultati se procjenjuju nakon 3 minute, nakon čega se doda kapljica izotonične otopine natrijevog klorida, ponovno se promiješa gnječenje ploče i nakon 5 minuta provodi se konačna procjena reakcije aglutinacije.

Pozitivnim izohemaglutinacijskim testom, pahuljice i zrna iz adheriranih crvenih krvnih stanica ne odstupaju pri dodavanju izotonične otopine natrijevog klorida i miješanju.

Kada je negativna reakcija kapi seruma na tanjuru su prozirne, ravnomjerno ružičaste boje, ne sadrže pahuljice i žitarice.

Moguće su slijedeće 4 kombinacije aglutinacijskih reakcija sa standardnim serumima I (0), II (A), III (B) skupina.

v Sva 3 seruma u obje serije ne aglutiniraju. Test krvi -

v Reakcija izohemaglutinacije negativna s serumskim P (A) skupinama oba niza i pozitivnim skupinama I (0) i III (B) seruma. Test krvi -

v Reakcija izohemaglutinacije je negativna u serumu III (B) skupine u obje serije i pozitivna sa serumom I (0) i II (A) skupina. Test krvi -

v Serum I (0), II (A), III (B) skupine daju pozitivnu reakciju u obje serije. Krv pripada skupini IV (AB). Ali prije davanja takvog zaključka, potrebno je provesti izohemaglutinacijsku reakciju sa standardnim serumom IV (AB) skupine koristeći isti postupak. Negativan izohemaglutinacijski test omogućuje konačno dodjeljivanje ispitivane krvi IV (AB) skupini.

2. Pojam Rh faktora.

U eritrocitima je otkriven još jedan antigen (aglutinogen), koji je nazvan Rh faktor. Svi su ljudi podijeljeni na pojedince s Rh-pozitivnim (Rh +) i Rh-negativnim (Rh) krvima. Utvrđeno je da 85% ljudi u eritrocitima sadrži Rh faktor, tj. Njihova krv je Rh-pozitivna, a 15% ih ne sadrži, tj. Krv tih ljudi je Rh-negativna. Na Rh faktor (Rh-antigen) u krvi obično nema anti-Rh-aglutinina (gotova antitijela). Takva se antitijela pojavljuju u krvnom serumu samo kao posljedica imunizacije osobe s Rh-negativnom krvlju s Rh-pozitivnim crvenim krvnim stanicama. Takva imunizacija nastaje kao rezultat ponovljenih transfuzija Rh-pozitivne krvi u Rh-negativnog primatelja ili tijekom trudnoće žene s Rh-negativnom krvlju kod Rh-pozitivnog fetusa. Imunizirani na ovaj način, ljudi postaju senzibilizirani: kada se transfuzija s Rh pozitivnom krvlju, razvije ozbiljna komplikacija - šok transfuzije krvi.

Brojanje broja leukocita i trombocita

Čimbenici koji utječu na ispravnost istraživanja bijelih krvnih stanica

- dugo čuvanje krvi na sobnoj temperaturi

Broj leukocita u krvi

Dob Broj leukocita

- 1 dan 11,6 - 22,0

- 1 tjedan 8.1.- 14.3

- 1 mjesec 7,6 - 12,4

- Odrasli 4.0 - 9.0

Metode za određivanje broja leukocita u krvi.

- Brojanje broja leukocita u komori za brojanje

- Broj leukocita u hematološkim analizatorima

Određivanje broja leukocita u komori za brojanje.

- Brojanje leukocita pod mikroskopom provodi se nakon liziranja crvenih krvnih zrnaca u 100 velikih kvadrata računske mreže i ponovno izračunava za 1 litru krvi, na temelju volumena kvadrata i razrjeđenja krvi. Brojanje leukocita treba provesti u roku od 2-4 sata nakon uzimanja krvi.

- U prisutnosti crvenih krvnih stanica u perifernoj krvi, one se ne liziraju i broje zajedno s leukocitima. U ovom slučaju, za određivanje pravog broja leukocita, broj stanica u crvenom redu se oduzima od ukupnog broja prebrojenih stanica.

- Na primjer: Ukupan broj leukocita u izračunu u komori (ili na analizatoru) -45x109 / l. Kada se izračunava formula leukocita, nađeno je da je prisutno 50 eritroblasta (normoblasta) na 100 leukocita.

Izračunavamo pravi broj leukocita u krvi:

150 stanica - 45 x 109 / l

100 stanica (leukociti) - X

X = 100x45x10 / l / 150 = 30x10 / l

Dakle, pravi broj leukocita u krvi je 30 x 109 / l.

Glavni izvori pogrešaka u izračunu leukocita u komori:

- Neispravan omjer volumena krvi i octene kiseline u epruveti.

- Neispravno pripremljena otopina octene kiseline (u koncentraciji većoj od 5%, mogu se lizirati neki leukociti, što će dovesti do podcjenjivanja rezultata).

- Produženo izlaganje uzorka na temperaturi iznad 28 ° C, što može ubrzati lizu leukocita u uzorku i dovesti do podcjenjivanja rezultata.

- Nepravilno punjenje komore Goryaev. Kao i kod brojanja crvenih krvnih zrnaca, fotoaparat mora biti ostavljen 1 minutu da se stanice slegnu.

- Kamera Goryaev nije bila dobro oprana nakon prethodne definicije. Leukociti koji ostaju u komori mogu precijeniti rezultate analize.

Metode brojanja trombocita

- u komori za brojanje

Svaka skupina metoda ima prednosti i nedostatke.

- Brojanje trombocita u komori je dovoljno precizno, ne zahtijeva izračunavanje broja crvenih krvnih stanica. S druge strane, ova metoda je zahtjevnija, jer su trombociti u izvornom obliku predstavljeni malim i slabo kontrastnim elementima. Nedostatak metode je brojanje trombocita u narednim satima nakon uzimanja krvi.

- Određivanje broja trombocita u razmazu krvi značajno je inferiorno po svojoj točnosti prema komornoj metodi ili automatskim brojačima. Pogreške u brojanju krvnih razmaza mogu biti uzrokovane lošom kvalitetom razmaza i pripadajućom neravnomjernom raspodjelom trombocita, netočnim određivanjem broja crvenih krvnih stanica. Značajan nedostatak metode je potreba za istovremenim brojanjem trombocita i crvenih krvnih stanica u krvi. Prednost je u mogućnosti proučavanja trombocita u bilo koje vrijeme, bez obzira na vrijeme prikupljanja krvi.

- Metoda određivanja trombocita pomoću hematološkog analizatora omogućuje točno određivanje broja trombocita, njihovog prosječnog volumena i raspodjele po volumenu.

Brojanje bijelih krvnih stanica

Leukocitoza može biti apsolutna (istinita) i relativna (redistributivna).

Apsolutna leukocitoza uočena je u akutnim upalnim procesima, nekrozi tkiva, akutnim bakterijskim infekcijama (s izuzetkom tifusne groznice, bruceloze, tularemije itd.), Alergijskim stanjima, malignim tumorima (s razaranjem tkiva), zatvorenim ozljedama glave i krvarenjima u mozgu, dijabetesom. uremička koma, šok, akutni gubitak krvi, kao primarna reakcija - zračenjem. Kod leukemije je utvrđeno značajno povećanje broja leukocita.

Relativna (redistributivna) posljedica je primanja leukocita u protoku krvi iz organa koji služe kao skladište za njega. To se događa nakon jela (leukocitoza hrane), toplih i hladnih kupki, jakih emocija (vegetovaskularna leukocitoza), intenzivnog mišićnog rada (miogene leukocitoze), itd.

Leukopenija. Leukopenija se smatra pokazateljem inhibicije funkcionalne sposobnosti koštane srži kao posljedice izloženosti toksičnim tvarima (arsen, benzen, itd.), Nekim lijekovima (sulfonamidi, kloramfenikol, butadion, imuno, ciklofosfamid itd.), Virusi (gripa, virusni hepatitis)., ospice, itd.), mikrobe (tifus, bruceloza itd.), ionizirajuće zračenje, rendgenske zrake i hipersplenizam (povećana funkcija slezene).

Leukocitoza i leukopenija rijetko su karakterizirane proporcionalnim povećanjem (smanjenjem) ukupnog broja leukocita svih vrsta (na primjer, leukocitoza s zgušnjavanjem krvi); u većini slučajeva dolazi do povećanja (smanjenja) broja bilo koje vrste stanica, stoga se upotrebljavaju izrazi "neutrofilija", "neutropenija", "limfocitoza", "limfopenija", "eozinofilija", "eozinopenija", "monocitoza", "monocitopenija"., "Bazofilija."

U kliničkoj procjeni promjena broja leukocita veliku važnost pridaje postotnom omjeru pojedinih oblika leukocita, odnosno leukocitne formule.

Leukocitna krvna slika zdrave osobe:

Relativni iznos Apsolutni iznos

Bazofili ……………………….0-1% 0-0.0650 x 10 9 / l

Eozinofili …………………….0.5-5% 0.02-0.30 x 10 9 / l

Neutrofili: - mielociti... 0% odsutni

- izboden... 1-6% 0,040-0,300 x 109 / l

- segmentirano….47-72% 2,0-5,5 x 10 9 / l

Limfociti …………………………….19-37% 1,2-3,0 x 10 9 / L

Monociti ………………………….3-11% 0,09-0,6 x 10 9 / L

Brojanje leukocita provodi se u obojenim razmazima periferne krvi. Kako bi se rezultati studije leukocitne formule ispravno protumačili, preporučuje se provesti izračun u apsolutnim iznosima, a ne u relativnim iznosima. Najčešće metode slikanja razmaza Romanovskog-Giemsa, Pappenheim. Pod imerzijom se broji najmanje 200 stanica, a zatim se dobije postotni omjer određenih tipova leukocita. Analiza leukograma uzimajući u obzir druge krvne parametre i kliničku sliku vrijedna je metoda pregleda, pomaže u dijagnozi i određivanju prognoze bolesti.

Glavni uzroci neutrofilije.

Akutne bakterijske infekcije - lokalizirane i generalizirane.

Upala ili nekroza tkiva.

Ljekoviti učinci (kortikosteroidi).

Glavni uzroci neutropenije.

Infekcije - bakterijske (tifus, bruceloza, tularemija, paratifus) i virusne (infektivni hepatitis, ospice, gripa, rubeola i dr.).

Mijelotoksični učinci i supresija granulocitopoeze (ionizirajuće zračenje; kemijska sredstva - benzen, anilin, DDT; ljekoviti učinci - citostatika i imunosupresivi; vitamin-B12-nedostatak folne kiseline, akutna aleukemijska leukemija, aplastična anemija).

Izloženost antitijelima (imuni oblici) - preosjetljivost na lijekove, autoimune bolesti (SLE, reumatoidni artritis, kronična limfna leukemija), izoimune manifestacije (hemolitička bolest novorođenčeta).

Preraspodjela i taloženje u organima - stanja šoka, bolesti sa splenomegalijom i hipersplenizmom.

Nasljedni oblici (obiteljska benigna kronična neutropenija).

Glavni uzroci eozinofilije.

Parazitske invazije (trihinoze).

Kronične kožne promjene - psorijaza, pemfigus, ekcem.

Tumori (eozinofilne varijante leukemije).

Ostale bolesti - fibroplastični endokarditis Lefflera, grimizna groznica.

U fazi oporavka infekcija i upalnih bolesti (povoljan prognostički znak).

Uzroci eozinopenije (aneozinofilija).

Povećana aktivnost adrenokortikosteroida u tijelu.

Glavni uzroci bazofilije:

Kronična mijeloidna leukemija i eritremija.

Glavni uzroci monocitoze.

Subakutne i kronične bakterijske infekcije.

Parazitske infekcije - lišmanijaza, malarija.

Hemoblastoza - monocitna leukemija, limfogranulomatoza, limfomi.

Ostala stanja su SLE, sarkoidoza, reumatoidni artritis, infektivna monocitoza; u razdoblju oporavka od infekcija, pri ostavljanju agranulocitoze, nakon splenektomije.

Smanjenje broja monocita je važno u procjeni omjera limfocita i monocita kod plućne tuberkuloze.

Glavni uzroci limfocitoze.

Infekcije - akutni virusni (infektivna mononukleoza, ospice, rubeola, boginje), kronična bakterijska (tuberkuloza, sifilis, bruceloza), protozoa (toksoplazmoza).

Hemoblastoza (limfocitna leukemija, limfom).

Ostale bolesti - hipertireoza, Addisonova bolest, vitamin B12-folna anemija, hipo-i aplastična anemija.

Limfocitopenija je opažena kod SLE, limfogranulomatoze, obične tuberkuloze limfnog čvora, završnog stadija bubrežne bolesti, akutne radijacijske bolesti, stanja imunodeficijencije i unosa glukokortikoida.

Povećanje ili smanjenje broja pojedinačnih tipova leukocita u krvi može biti relativno ili apsolutno. Ako se samo promijeni postotak određenog tipa bijelih krvnih stanica, tada dolazi do relativne neutrofilije, relativne eozinopenije itd. Povećanje ili smanjenje apsolutnog sadržaja bilo koje vrste leukocita, odnosno broja tih stanica po jedinici volumena krvi, naziva se apsolutna neutrofilija, apsolutna eozinopenija itd.

Pomicanje formule ulijevo (povećanje broja mladih oblika neutrofila) znak je upale ili nekrotičnog procesa u tijelu.

Pomak leukocitne formule u desno je karakteristika radijacijske bolesti i vitamina B12-nedostatak folne kiseline.

Izostanak ili značajno smanjenje broja svih vrsta granularnih leukocita - granulocita (neutrofila, eozinofila, bazofila) označeno je izrazom agranulocitoza. Ovisno o mehanizmu pojave, razlikuju se mijelotoksičnost (učinci ionizirajućeg zračenja, citotoksični lijekovi) i imunološki (hapten i autoimune agranulocitoza).

kalkulator

Besplatni troškovi rada

  1. Ispunite zahtjev. Stručnjaci će izračunati cijenu vašeg rada
  2. Izračunavanje troškova dolazi na poštu i SMS

Vaš broj prijave

Trenutno će se na mail poslati pismo s automatskom potvrdom s informacijama o aplikaciji.

Brojanje broja leukocita: koju metodu odabrati?

Da bi se utvrdila funkcija imunološkog sustava, prisutnost zaraznog procesa, terapeuti propisuju analizu za brojanje bijelih krvnih stanica. Postoje različite metode istraživanja. Moguće je odrediti broj stanica pod mikroskopom ili pomoću poluautomatskog analizatora. Svaka metoda ima prednosti i nedostatke.

Opći i diferencijalni izračun broja leukocita

Ukupni broj leukocita provodi se u ispitivanju krvi. Odredite broj ne samo bijelih krvnih stanica, već i drugih formiranih elemenata. Pomoću metode brojanja leukocita moguće je utvrditi ne samo abnormalnosti imunološkog sustava, već i druge bolesti i stanja. Općenito, krvna slika određena je brojem crvenih krvnih stanica, hemoglobinom, trombocitima, formulom leukocita, ESR-om.

Zahvaljujući UAC-u, identificiraju se sljedeća patološka stanja:

  • upalni proces;
  • oslabljen imunološki sustav;
  • virusne, bakterijske, parazitske infekcije;
  • anemija ili eritrocitoza;
  • povećanog ili smanjenog zgrušavanja krvi.

Diferencijalno brojanje broja leukocita omogućuje vam da odredite postotak njihove populacije. Provesti istraživanja na poluautomatskom analizatoru. Ako liječnik sumnja, propisati ručni test razmaza krvi. Uz to, možete odrediti stanje stanica, njihov izgled.

U leukocitnoj formuli određuju se sljedeći pokazatelji:

Opći test krvi ne samo da može pratiti stanje imunološkog sustava, već i identificirati druge čimbenike koji uzrokuju poremećaje u tijelu. Utvrđene su sljedeće povrede:

  • prisutnost bakterija ili virusnih sredstava;
  • alergijska reakcija na strani agens;
  • prisutnost parazitske infekcije;
  • pojava malignog i benignog tumora.

Utvrđuje se ne samo kvantitativni sastav leukocitne formule, nego i prisutnost mladih ili više odraslih stanica. Stoga se kaže da je formula pomaknuta ulijevo (prema mladim stanicama) ili desno (prema zrelim stanicama).

Povećanje broja mladih neutrofila može biti u sljedećim slučajevima:

  • upala;
  • nekroza (nekroza) tkiva;
  • infekcije;
  • trovanja;
  • uzimanje lijekova;
  • privremeno fiziološko povećanje stanica.

Pomak formule leukocita udesno je u sljedećim slučajevima:

  • bolest zračenja;
  • nedostatak vitamina;
  • zatajenje bubrega;
  • zatajenje jetre;
  • privremena promjena u krvi nakon transfuzije.

Metode za brojanje broja leukocita

Postoje različite metode za diferencijalni izračun formule leukocita. Liječnik ih odabire ovisno o opremljenosti klinike, namjeravanoj dijagnozi, stanju pacijenta.

  • Diferencijalno brojanje apsolutnog broja leukocita u nomogramu. Otkrivene su sve vrste stanica, njihov postotni omjer. Odredite povećanu ili smanjenu vrijednost bilo kojeg pokazatelja. Negativna strana - ne otkriva oblik, veličinu, oštećenje stanica. Tehnika se izvodi na poluautomatskom analizatoru.
  • Diferencijalno brojanje pojedinačnih oblika leukocita. Analiza je potrebna kada se otkrije povreda u općoj formuli leukocita. Liječnik propisuje liječenje, uz pomoć istraživanja prati njegovu tendenciju. Izvodi se na poluautomatskom analizatoru.
  • Vizualni proračun broja leukocita pomoću mikroskopa i komore za brojanje. Liječnik vizualno broji broj stanica u danom volumenu tekućine, ocjenjuje njihov oblik, veličinu i integritet.

Brojanje leukocita u komori za brojanje

Za brojanje leukocitnih stanica koristi se posebna komora na kojoj se nanosi staklena ploča. Na žljebovima uređaja za brojanje nalazi se mikroskopska rešetka s velikim i malim kvadratima, pomoću kojih se broje oblikovani elementi. Uređaj mora biti sterilan, pripremljen za uporabu.

Istraživanje se provodi u nekoliko faza.

  • Dobivena krv za brojanje leukocita se 20 puta razrijedi octenom kiselinom.
  • Dobivena tekućina se sakuplja pomoću staklene šipke, dodaje se unutar komore.
  • Mikroskop je usmjeren, broji sve bijele krvne stanice dok se kreće s lijeva na desno, dolje, s desna na lijevo. Leukociti u krvnoj slici u 100 kvadrata, u mokraći - preko rešetke.
  • Dobiveni podaci zamjenjuju se formulom za brojanje leukocita, izračunavajući ukupni broj leukocita. To je potrebno jer je krv razrijeđena.

Kada pregledate razmaz, liječnik ne samo broji broj stanica, nego i skreće pozornost na njihov izgled. Ako se otkriju oštećene ili izmijenjene stanice, to se bilježi na obrascu istraživanja.

Važno je! Brojanje broja bijelih krvnih stanica pomoću kamere može se koristiti za krv i urin.

Otopine i reagensi za brojanje bijelih krvnih stanica

Pripremljeni reagensi su potrebni za korištenje komore za brojanje. Liječnik bi trebao znati kako pripremiti krv za brojanje bijelih krvnih stanica.

  • Otopina octene kiseline za brojanje bijelih krvnih stanica, 3-5%. Bitno za razrjeđivanje krvi, uništavanje crvenih krvnih stanica. Crvene krvne stanice mogu ometati gledanje bijelih krvnih stanica.
  • Metilensko plavo. Bijele krvne stanice su transparentne, nevidljive bez uporabe određenih reagensa. Metilenska boja oboji stanice tako da je vidljiva njihova membrana i unutarnja struktura. Laboratorij može pregledati granule unutar ćelije, oštećenja, poremećaje, atipične.
  • Etil alkohol potreban je za dezinfekciju površine komore za brojanje i staklenih stakala. Prije uporabe uređaja obrišite, nakon završetka ispitivanja, potpuno je uronjen u etilni alkohol.
  • Destilirana voda. Za uklanjanje tragova etilnog alkohola.

Leukociti računaju na analizator

Za točan izračun svih oblikovanih elemenata koristi se brojanje broja leukocita na hematološkom analizatoru. Izračunava stanice u 1 ml biološke tekućine. Postoje dvije vrste analizatora:

  • konduktometrijski (uređaj pokazuje kroz oblikovane elemente, izračunavajući njihove različite parametre, što omogućuje izračunavanje crvenih krvnih stanica, trombocita, bijelih krvnih stanica);
  • svjetlo-optički (izračunava ne samo broj stanica, već i njihovu kvalitetu).

Za istraživanje prikupiti svježu krv ili urin, proizvesti 1 ml. Za izračun leukocita potrebno je razrjeđivanje posebnim reagensima koji eliminiraju prisutnost crvenih krvnih stanica. Laboratorijski asistent postavlja biološki fluid u aparat, koji sam izračunava oblikovane elemente. Uređaj daje rezultat analize, koji se šalje liječniku.

Prednosti tehnika brojanja leukocita:

  • smanjenje rizika od medicinske pogreške;
  • određivanje velikog broja analiza u jednom radnom danu;
  • točnost brojanja stanica.

Negativni aspekti metode:

  • visoku cijenu uređaja koji si ne mogu priuštiti sve klinike;
  • nedostatak vizualnog pregleda stanja stanica.

Kod brojanja na analizatoru leukociti su označeni LEU, izraženi u μl (mikrolitara).

Izračuni zaostalih leukocita

Za optičko gledanje i brojanje preostalih bijelih krvnih zrnaca moguće je koristiti ADAM stroj. U tu svrhu koristi se fluorescentna tvar koja označava samo leukocite. Za trombocite i crvene krvne stanice nije primjenjivo.

Metoda se izvodi u nekoliko faza:

  • uzimanje kapilarne krvi;
  • liječenje biološke tekućine pomoću propidij jodida, koji se veže samo za DNA leukocita (trombociti i crvene krvne stanice nemaju jezgre);
  • stavljanje čipa u uređaj;
  • uređaj se fokusira na fluorescentnu luminiscenciju, stanice se snimaju i broje i prikazuje se njihova slika.

Metoda je vrlo informativna, jer daje točne rezultate. Liječnik može pregledati sliku stanice u stvarnom vremenu.

Broj leukocita u razmazu

Za hvatanje leukocita u razmazu potrebna je svježa kapilarna krv. Ona je razmazana na staklenoj ploči odmah nakon prikupljanja biomaterijala. Zatim proizvesti bojenje Romanovsky-Giemsom. Pomoću metode sve su stanice fiksirane i obojene, a daljnje reakcije se ne događaju.

Brojanje broja leukocita na pokrovnom staklu provodi se pomoću mikroskopa. Nanesite uronjeno ulje tako da sve stanice budu bolje pregledane. Mikroskop se prenosi u potopnu leću.

Stanice u uzorku su neujednačene:

  • na periferiji - monociti i granulociti;
  • limfociti u sredini.

Mikroskop se pomiče s lijeva na desno, dolje, s desna na lijevo. Razmaza se broji sve dok ukupan broj stanica ne dostigne 100 jedinica. Podaci za svaku vrstu leukocita unose se u obrazac studije.

Broj leukocita u urinu

Provesti istraživanje uniformnih elemenata i drugih formacija u urinu metodom brojanja leukocita prema Nechiporenku. Ta se biološka tekućina stavlja u epruvetu, centrifugira. Ovom metodom se sve formacije talože. Odabire se, prebacuje u komoru za brojanje.

Zatim napravite broj crvenih krvnih stanica, bijelih krvnih stanica, cilindara u velikim i malim trgovima. Normalno, zdrava osoba ne smije imati više od 2 bijela krvna zrnca po uzorku biološke tekućine.

Leukocitna formula je najvažnija studija koja vam omogućuje da odredite tjelesnu reaktivnost kao odgovor na gutanje infektivnog agensa. Bolest se može pojaviti u latentnom obliku, može se sumnjati u procesu brojanja bijelih krvnih stanica. Test krvi vam omogućuje da utvrdite stanje imuniteta, pojavu upalnih procesa u unutarnjim organima. Određivanje leukocita u urinu otkriva nepravilnosti u mokraćnom sustavu.

Jedinstvena metoda za brojanje broja krvnih leukocita u komori za brojanje;

Metode brojanja broja leukocita u krvi

Unified 2 metode za određivanje broja leukocita u krvi:

- u komori za brojanje;

- pomoću hematoloških analizatora.

Princip: Leukociti se broje pod mikroskopom u određenom volumenu komore za brojanje konstantnim razrjeđivanjem krvi nakon uništenja crvenih krvnih stanica.

Reagens: 3-5% otopina octene kiseline, obojena s vodenom otopinom metilenskog plavog da oboji jezgre leukocita i olakša njihovo brojanje. Otopina je plave boje, stabilna u skladištu.

Posebna oprema: mikroskop, komora za brojanje Goryaeva.

Tijek određivanja. Pomoću mjerne pipete ili automatskog dozatora, točno 0,4 ml otopine octene kiseline se ulije u epruvetu za aglutinaciju i u nju se doda 0,02 ml (Sali kapilara) krvi. Isperite kapilaru nekoliko puta s otopinom kiseline i pomiješajte sadržaj epruvete. To rezultira razrjeđivanjem krvi 20 puta. Ostavite do brojanja, ali ne više od 2-4 sata nakon uzimanja krvi. Komora Goryaev je spremna za rad brisanjem pokrivnog stakla tako da se pojavljuju duginih prstena. Još jednom temeljito protresite sadržaj epruvete i napunite Goryavovu komoru s ovom mješavinom pomoću Pasteurove pipete ili staklene šipke s rastaljenim krajem. Napunjenu komoru za brojanje ostavite 1 minutu u vodoravnom položaju za taloženje leukocita. Bijele krvne stanice broje se u 100 velikih ne-grafiranih kvadrata komore za brojanje pod sljedećim uvjetima: kondenzator se spušta, okular 10x ili 15x, leća 8x. Brojanje počinje od gornjeg lijevog kuta rešetke Goryaevove kamere. Prilikom brojanja leukocita, oni se rukovode pravilom: sve stanice unutar kvadrata i na crtama razgraničenja broje se ako one uglavnom idu unutar kvadrata. Stanice ispresijecane razdjelnicom točno na pola, broje se samo na dvije strane kvadrata (na primjer, lijevo i gornje).

Proračun. Pri izračunavanju broja leukocita u 1 μl krvi, koristite formulu:

- broj leukocita u 1 ml krvi;

a - broj leukocita izračunat u 100 velikih kvadrata;

4000 - faktor konverzije volumena do 1 µl, na temelju volumena malog kvadrata, koji je µl;

1600 - broj brojenih malih kvadrata;

20 - razrjeđenje krvi.

Da bi se broj leukocita pretvorio u SI jedinice (u 1 l krvi), dobiveni broj se množi s 10 6.

Praktično za određivanje sadržaja leukocita u 1 l krvi, broj leukocita, izračunat u 100 velikih kvadrata komore za brojanje, množi se s 50, podijeljeno sa 1000 (to jest, prebacuje se na zarez s 3 znaka ulijevo) i pomnoženo s 10 9.

Broj leukocita

Za prikupljanje krvi u mješalici leukocita do oznake 0,5. Odmah dodajte u krv otopinu za razrjeđivanje od 3% octene kiseline kako biste označili 11. Temeljito promiješajte sadržaj kapilare i njime dopunite Goryaevovu komoru. Brojanje se provodi na najmanje 100 velikih kvadrata. To su velike neoznačene crte, koje su grupirane u četiri u rešetki Goryajeve komore. Izračunajte broj leukocita u 1 l krvi pomoću formule:

L = N x 4000 x 20 x 10 6

gdje je: N broj leukocita u stotinu velikih kvadrata; 4000 je množitelj koji smanjuje volumen malog kvadrata na volumen od 1 μl krvi; - korekcija za stupanj razrjeđenja krvi; 1600 - broj leukocita u malim kvadratima; 10 6 - broj mikrolita u 1 l.

Preporuke za registraciju

U zaključku, usporedite dobivene rezultate s normalnim vrijednostima.

Lab № 7.3

Određivanje hemoglobina u krvi

194.48.155.245 © studopedia.ru nije autor objavljenih materijala. No, pruža mogućnost besplatnog korištenja. Postoji li kršenje autorskih prava? Pišite nam | Kontaktirajte nas.

Onemogući oglasni blok!
i osvježite stranicu (F5)
vrlo je potrebno

Broj bijelih krvnih stanica

Da bi se izračunao broj leukocita, krv se 20 puta razrijedi reagensom - Turk tekućinom (3% octena kiselina obojena metilenskim plavim). Kiselina uništava membrane krvnih stanica (eritrociti i leukociti), a metilensko plavo oboji jezgru leukocita. Uzgoj se može vršiti u leukocitnim melangeresima (mješalicama) ili epruvetama.

Za cijevnu metodu razrjeđivanja uzmite 0,4 ml Turk tekućine i dodajte 0,2 ml krvi. Dobivena otopina se miješa, puni u komoru Goryaev, stavi pod mikroskop, a bijele krvne stanice se broje u Goryaev mreži.

Izbrojite u 100 velikih neprekinutih kvadrata. Broj leukocita izračunava se pomoću formule:

Dobivamo broj leukocita u 1 μl krvi, na primjer, 4500 (4,5 tisuća u 1 μl) ili 4,5 * 10 9 / l.

Povećanje broja leukocita naziva se leukocitoza.. Leukocitoza je fiziološka, ​​medicinska i patološka.

fiziološki Leukocitoza je uočena tijekom trudnoće, nakon jela kod monogastričnih životinja, a također i nakon teškog fizičkog napora.

medicinski leukocitoza se događa nakon parenteralne primjene pripravaka životinjskih proteina, vakcina, seruma itd.

patološki leukocitoza se javlja uvijek kod upalnih procesa, gnojno-nekrotičnih procesa i zaraznih bolesti.

Smanjenje broja leukocita naziva se leukopenija.. To se događa u iscrpljenosti, zračenju, određenim zaraznim i virusnim bolestima.

Ispitivanje morfologije krvnih stanica

Morfologija krvnih stanica proučava se u razmazu krvi pod mikroskopom. Za to trebate kuhati razmaz krvi.

Koristite čisto, obrano staklo.

Prilikom stvaranja razmaza, klizač je pričvršćen između palca i srednjih prstiju lijeve ruke. U desnoj ruci nalazi se staklo za pokrivanje zemlje. Za dobivanje kvalitetnih mrlja potrebno je uzeti male kapi krvi.

Oslonite rub pokrovnog stakla na kap krvi koja se nalazi na klizaču i omogućite da se ona raspodijeli između dvije čaše. Ako su čaše čiste i suhe, krv se zbog kapilarnosti distribuira gotovo trenutno. Kut između pokrovnog stakla i stakalca ne smije prelaziti 45-50 o. Pokrovno staklo se fiksira između prstiju desne ruke tako da vrh jednog ili oba prsta dodiruje rub klizača. U tim slučajevima dobivaju se mrlje s glatkim rubovima. Pomicanjem poklopca na predmet mirno i ne vrlo brzo pripremite razmaz. Krv prilikom pomicanja pokrovnog stakla proteže se iza stakla i ne može se ozlijediti.

Pogreške u pripremi razmaza

Dobro pripremljen razmaz bi trebao zauzimati 2/3 stakla i završiti "umutiti".

Nakon pripreme, razmaz treba isušiti. Onda ga potrošite fiksacija kako bi se spriječilo uništavanje krvnih stanica i fiksiranje na staklo.

Nakon fiksacije nastupaju boja potezima četkica. Postoji nekoliko načina za bojanje razmaza krvi:

Metoda Romanovskog-Giemsa. Fiksiran etilnim alkoholom (20 minuta) ili mješavinom Nikiforova (etilnog alkohola + etil etera u omjeru 1: 1) razmazima ulijte radnu otopinu bojila Romanovsky-Giemsa 20-30 minuta. Zatim se razmazi isperu destiliranom vodom, osuše i mikroskopski. Priprema radne otopine: 2 kapi tvorničke boje na 1 ml destilirane vode.

Metoda Mai-Grunwald. Osušeni pripravak fiksira se koncentriranom otopinom iosina Mai-Grunwalda 3 minute, ispere destiliranom vodom. Zatim su razmazi obojeni radnom otopinom 10 minuta, ponovno isprani destiliranom vodom, osušeni i mikroskopski ispitani.

Postoji nekoliko načina mikroskopija ovisno o kvaliteti pripreme razmaza.

Ako je razmaz deblji, onda je bolje mikroskopirati u području "metlice" metodom istog polja.

Ravnomjerno razmazati mikroskopski na nekoliko načina:

Pod mikroskopom se stavi razmaz krvi, primjenjuje se i ispituje kap inverznog ulja.

Prvo istražite leukociti. Ovisno o prirodi i prisutnosti zrnatosti u citoplazmi, leukociti se dijele na:

- granulociti ili granulati: eozinofili, bazofili, neutrofili; njihova citoplazma sadrži zrnatost;

- agranulociti ili ne-granularni: limfociti, monociti; njihova citoplazma ne sadrži pijesak.

U istraživanju bijelih krvnih stanica dolazi leukogram - je postotak određenih vrsta leukocita zabilježenih u određenom redoslijedu. Zbroj stanica leukograma mora biti jednak 100.

* - apsolutni broj svake vrste leukocita

Bazofily. Jezgra je nepravilnog oblika, citoplazma sadrži granulaciju tamno ljubičaste boje. Normalno 0,1-0,2, najčešće nisu u leukogramu.

Eozinofily. Sadrži se u citoplazmi ružičastog ili svijetlo crvenog zrna (granule).

Heytrofily. Njihova granularnost u citoplazmi je gotovo nevidljiva. Ovisno o zrelosti neutrofila dijele se na:

- Mielotsity - nezreli oblik neutrofila; javlja se samo kod jake patologije. Sadrže zaobljenu jezgru.

- U procesu sazrijevanja dolazi do središnjeg udubljenja jezgre à YooNye neutrofili: ima izgled potkovice, nalazi se samo u patologiji; nezreli oblik neutrofila.

- Palochkoyadernye neutrofili - normalno prisutni u maloj količini (0-5). Pripadaju nezrelim oblicima neutrofila.

- Cona je nuklearna neutrofili su zreli oblik neutrofila. Jezgra je segmentirana, sastoji se od 2-5 segmenata, koji su spojeni tankim vratovima. Ako je segmentirani neutrofil "star", onda je segment jezgre odvojen jedan od drugog i jezgra je uništena.

Lstanice implantata - velike ćelije, gotovo u cijelosti sastavljene od jezgre, koja je obojena tamno ljubičastom bojom; citoplazma je svijetloplava, može biti nevidljiva. Nedostaje citoplazma zrna.

Sve životinje, osim mačke, imaju profil limfocita; mačka je neutrofilna.

Monotsity - velike stanice s jezgrom nepravilnog oblika. Nema granularne citoplazme.

Promjena leukograma pojavljuje se na tri načina:

1) Povećanje ili smanjenje sadržaja određenih tipova leukocita, tj. vrsta leukocitoza i vrsta leukopenije.

2) Pojava u leukogramu mladih i nezrelih oblika neutrofila.

3) Pojava patoloških promjena u jezgri i citoplazmi.

Specifična leukocitoza i vrsta leukopenije

Naziva se povećanje bazofila bazofilija.

Povećani eozinofili - eozinofilija.

Smanjenje eozinofila - hypoeosinophilia.

Naziva se povećanje bilo koje vrste neutrofila neutrofilije.

Naziva se smanjenje bilo koje vrste neutrofila neutropenija.

Povećanje limfocita - limfocitoza.

Smanjenje limfocita - limfopenija.

Povećanje monocita - monocitoza.

Smanjenje monocita - monotsitopeniya.

Povećanje ili smanjenje sadržaja bilo koje vrste leukocita može biti apsolutno i relativno.

Apsolutna vrsta leukocitoze karakterizirano povećanjem apsolutnog broja leukocita ovog tipa s normalnim ili povišenim ukupnim brojem leukocita u krvi.

Relativna vrsta leukocitoze praćeno je smanjenjem ukupnog broja leukocita i prevladavanjem leukocita ovog tipa u krvi zbog smanjenja broja drugih oblika stanica. U isto vrijeme, apsolutni broj leukocita prevladavajućih vrsta ostaje unutar normalnih granica.

Ponekad se, uz leukogram (brojanje u razmazu krvi), odredi ukupan broj leukocita i apsolutni sadržaj leukocita svake vrste u 1 μl krvi (u komori Goryaev).

Pri ocjenjivanju leukograma, pojam "jezgra leukograma”. Jezgra leukograma su neutrofili.

S porastom postotka leukocita, kao i mijelocita i juvenila, govore o pomak jezgre ulijevo.

S povećanjem postotka segmentiranih leukocita govore o tome desni pomak.

Indeks nuklearnog pomaka određuje se pomoću formule: IP =.

U normalnim uvjetima broj nuklearnog indeksa nuklearnog pomaka i segmentiranog neutrofila ne prelazi 0,06-0,08.

Nuklearni pomak od 0,08 do 0,15 to se zove slabo lijevo pomak.

Nuklearni pomak od 0.15 do 0.45 to se zove sredina lijevo pomak.

Pokazatelj nuklearnog pomaka ispod 0,05 ukazuje na desni pomak.

neutrofilije - povećanje bilo koje vrste neutrofila.

neutrofilije s pomakom jezgre ulijevo Postoji nekoliko varijanti:

1. Neutrofilija s jednostavnim regenerativnim pomakom karakterizirano povećanjem broja ubodnih neutrofila na 10-15%. Istodobno je postotak segmentiranih nuklearnih stanica normalan ili smanjen. Ukupan broj leukocita neznatno se povećao. Ovaj se tip neutrofilije uočava kod akutnih akutnih infekcija, upalnih i nekrotičnih procesa mekih tkiva s benignim tijekom (gnojne rane, lokalni gnojni edemi).

2. Neutrofilija s oštrim regenerativnim pomakom popraćeno pojavom u krvi mladih neutrofila, a ponekad i mijelocita, povećanjem postotka uboda i snižavanjem segmentiranih neutrofila. Povećan je ukupan broj leukocita. Dolazi do akutnih infekcija, peritonitisa, upalnih bolesti unutarnjih organa.

3. Neutrofilija s degenerativnim pomakom karakterizirano povećanjem postotka ubodnih stanica, pojavom degenerativnih oblika neutrofila, smanjenjem segmentiranih stanica. Ukupan broj leukocita u isto vrijeme ostaje normalan ili neznatno smanjen. Ovo stanje se razvija s produljenim izlaganjem krvotvornim organima bakterijskih otrova, kemikalijama, s teškim invazijama gnjilima, iscrpljenjem.

Neutrofilija s pomakom jezgre u desno karakterizirano povećanjem postotka segmentiranih neutrofila s normalnim ili neznatno smanjenim postotkom uboda. Može biti od tri opcije:

1. Blagi porast u postotku segmentiranih na pozadini male leukocitoze - opaženi nakon gubitka krvi, uz blagi tijek zaraznih bolesti.

2. Povećanje postotka segmentiranih s normalnim ili smanjenim brojem bijelih krvnih stanica - kod starih i iscrpljenih životinja.

3. Značajno povećanje segmentne jezgre s smanjenjem ili odsutnošću trake i izraženom leukopenijom - zabilježeni su u kroničnim septičkim procesima, onkologiji, teškim invazivnim bolestima.

neutropenija - smanjenje ukupnog broja neutrofila. Neutropenija je opažena u infektivnim i virusnim bolestima koje se javljaju s limfocitozom. Neutropenija na pozadini gnojno-upalnog procesa ukazuje na smanjenje otpornosti tijela i nepovoljan tijek bolesti.

limfocitoza - povećanje broja limfocita. Pojavljuje se uglavnom kod virusnih i bakterijskih bolesti, u krvnim bolestima i kao relativna limfocitoza u neutropeniji.

hypolymphemia - smanjenje postotka limfocita. Često limfocitopenija prati neutrofiliju. Najsnažnija limfocitopenija je zabilježena u imunodeficijencijama.

eozinofilija - povećanje postotka eozinofila. To je češće s helminthiasis, s ectoparasites, alergijske bolesti. Eozinofilija se također promatra tijekom prijelaza akutno teče u kronične bolesti.

monocitoza - povećanje postotka monocita. Često se opaža u fazi oporavka, s infektivnim i gnojnim upalnim bolestima, što ukazuje na dobru otpornost tijela.

bazofilija - povećanje postotka bazofila. Obilježeni su helminthiaisom, alergijskim stanjima, kroničnim bolestima gastrointestinalnog trakta.

Eritrociti zdravih životinja imaju slijedeće morfološke značajke: odsutnost jezgre, bojenje u crvenkastoj ili crvenkasto-narančastoj boji, oblik bikonkavnog diska.

Glavne razlike između eritrocita različitih vrsta životinja su različite veličine eritrocita i intenzitet središnje zone prosvjetljenja.

Također, morfološka značajka koja može biti prisutna kod zdravih životinja je kohezija crvenih krvnih stanica u obliku kolone za novac. Najizraženiji stupac u krvi konja i mačaka. Kod goveda se takve formacije ne poštuju.

Patološke promjene eritrocita češće se opažaju s anemijom i karakteriziraju:

1. Promjena veličine - anisocytosis, kada se eritrociti pojavljuju više nego obično (makrofitoza) i manje nego obično (mikrocitoza);

2. Promjenom obrasca - microplania - pojavu eritrocita ovalnog, zvjezdastog ili bilo kojeg drugog nepravilnog oblika;

3. Promjena boje - anizohromiya Mogu se pojaviti hipokromni i hiperkromni eritrociti.

U crvenim krvnim stanicama mogu se otkriti raznim inkluzijama.

Publikacije O Dijagnostici Jetre

Medicina žutice za medicinu novorođenčadi

Analize

Koja je stopa i granica bilirubina u novorođenčadi?Za liječenje jetre naši su čitatelji uspješno koristili Leviron Duo. Vidjevši popularnost ovog alata, odlučili smo ga ponuditi vašoj pozornosti.

JVP hipokinetički tip: simptomi, prevencija, liječenje

Analize

Rad bilijarnog trakta i jetre ima ogroman utjecaj na probavni proces: čak i malo odstupanje od norme dovodi do brojnih negativnih simptoma. Jedan od najčešćih problema je diskinezija žučnog sustava (JVP) - to je funkcionalno oštećenje žučnog mjehura, što dovodi do promjena u probavi.

Osjećaj pucanja u desnoj hipohondriji: glavni uzroci, patološki simptomi, mogućnosti liječenja

Dijeta

Pojava opipljivog osjećaja luka u desnom hipohondru čest je simptom koji se može očitovati u raznim bolestima.

Zašto povećati slezenu i kako izliječiti bolest?

Dijeta

Slezena je slabo proučen organ. Često se kršenja u svom radu slučajno bilježe tijekom općeg pregleda. A ako se uvećana slezena dijagnosticira "unutar normalnog raspona", lako je propustiti razvoj bolesnog stanja u njegovim ranim fazama.